Description

• NeoSupreme qPCR Green Master Mix (2x), ROX : mélange réactionnel à haute efficacité pour une qPCR sensible, rapide et reproductible.
• Le mécanisme de l’enzyme Hot-start améliore la spécificité et la sensibilité de la réaction.
• Contient un colorant intercalant vert, des dNTP, des stabilisants, des amplificateurs et le colorant de référence ROX.
• Conçu pour une analyse précise de l’expression génique et une large compatibilité avec les instruments de qPCR.
• Prêt à l’emploi : il suffit d’ajouter les amorces et la matrice d’ADN.

Conditions de stockage et préparation des réactifs

Ce mélange réactionnel doit être conservé entre -85°C et -15°C dans un congélateur sans cycles de décongélation afin de garantir une durée de conservation optimale. Il est recommandé de limiter le nombre de cycles de congélation-décongélation en répartissant le produit en aliquotes adaptées à l’utilisation. Le produit reste stable jusqu’à la date d’expiration lorsqu’il est conservé dans les conditions spécifiées. Le colorant vert étant photosensible, le mélange réactionnel doit être protégé de la lumière autant que possible.

Instruments de PCR en temps réel compatibles

Le mélange réactionnel est compatible avec les instruments qui mesurent le signal de référence passive. Il est également compatible avec les instruments ne nécessitant pas de signal de référence passive pour la normalisation des données. Le NeoSupreme qPCR Green Master Mix (2x), ROX a été optimisé pour être compatible avec les instruments de PCR en temps réel suivants : Applied Biosystems : 7500 ; 7500 FAST ; QuantStudio™ 5, 6, 7, 12k Flex & ViiA7™.

Contrôles qualité

• Contamination par l’ADN génomique

Le produit doit respecter les critères internes relatifs à la contamination par l’ADN, évaluée par qPCR en temps réel.

• Tests d’activité nucléasique

Pour évaluer une éventuelle contamination par des DNases, 0,2 à 0,3 μg d’ADN plasmidique pNZY28 sont incubés avec le mélange réactionnel pendant 14 à 16 h à 37 °C. Pour évaluer une éventuelle contamination par des RNases, 1 μg d’ARN est incubé avec le mélange réactionnel pendant 1 h à 37 °C. Après incubation, les acides nucléiques sont visualisés sur un gel d’agarose coloré avec GreenSafe. Aucune entaille ni dégradation visible des acides nucléiques ne doit être observée.

• Test fonctionnel

Les mélanges réactionnels NeoSupreme qPCR Green Master Mix font l’objet de tests approfondis afin d’évaluer leur activité, leur processivité, leur efficacité, leur sensibilité et leur activation thermique.