Le milieu RPMI (Roswell Park Memorial Institute Medium) est l'une des formulations les plus utilisées pour la culture de cellules de mammifères. Il a été initialement mis au point au Roswell Park Cancer Institute dans les années 1960. Spécifiquement conçu pour favoriser la croissance des cellules leucémiques humaines en suspension et en monocouche, le milieu RPMI-1640 a depuis lors fait preuve d'une polyvalence exceptionnelle dans un large éventail de types de cellules et de conditions expérimentales.
Sa formulation équilibrée, son adaptabilité et ses performances fiables ont fermement établi le RPMI comme un membre essentiel de la famille des milieux de base classiques.
Composition et caractéristiques distinctives
Le milieu RPMI-1640 se distingue des autres milieux classiques par les éléments suivants
- Des concentrations plus élevées en phosphate (pour un meilleur pouvoir tampon)
- Des concentrations réduites en calcium (important pour les cellules en suspension).
La formulation du milieu assure une osmolalité physiologique et un équilibre du pH pendant la culture in vitro, ce qui le rend particulièrement adapté aux lignées cellulaires à croissance rapide.
- Acides aminés supplémentaires
- Vitamines (telles que la biotine et la vitamine B₁₂)
- Glucose (standard 2 g/L, bien qu'il existe des variantes à haute teneur en glucose)
- Tampon HEPES (dans certaines variantes pour une meilleure stabilité du pH)
Applications de RPMI dans la culture cellulaire
RPMI est largement utilisé pour la culture d'un large spectre de cellules de mammifères, notamment :
- Les lymphocytes (cellules T et cellules B)
- Hybridomes (pour la production d'anticorps monoclonaux)
- Cellules leucémiques (telles que Jurkat, HL-60)
- les cellules HeLa
- les cellules hématopoïétiques primaires
Il est particulièrement apprécié pour :
- La recherche en immunologie
- La recherche sur le cancer
- Production de vaccins
- Les études de thérapie génique
- Essais cellulaires (par exemple, cytotoxicité, prolifération, activation)
En outre, RPMI est hautement compatible avec des suppléments tels que le sérum bovin fœtal (FBS), les interleukines ou des facteurs de croissance spécifiques, ce qui permet aux chercheurs d'ajuster les conditions de culture en fonction de divers plans expérimentaux.
Avantages de l'utilisation du milieu RPMI
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Polyvalence pour tous les types de cellules
RPMI-1640 prend en charge à la fois les cellules adhérentes et les cellules en suspension, ce qui le rend idéal pour divers besoins expérimentaux. -
Capacité de tamponnage améliorée
Le système de tamponnage du phosphate assure un contrôle robuste du pH, même dans des environnements atmosphériques (sans CO₂) ou pendant des cultures prolongées. -
Adaptabilité aux conditions sans sérum
RPMI peut être modifié pour des formulations sans sérum ou à faible teneur en protéines, cruciales pour des applications biopharmaceutiques ou immunologiques spécifiques. -
Facilité de personnalisation
Les chercheurs peuvent facilement compléter RPMI avec des cytokines, des hormones ou d'autres additifs pour cultiver des cellules spécialisées ou primaires. -
Des performances éprouvées en recherche clinique
Compte tenu de son utilisation historique et actuelle dans le développement de vaccins et l'immunothérapie, RPMI continue à soutenir la recherche et la production de qualité clinique.