Les octamères d’histones sont des complexes protéiques définis composés de deux copies de chacune des histones centrales H2A, H2B, H3 et H4, assemblées en un cœur octamérique canonique qui enroule environ 147 paires de bases (pb) d’ADN pour former le nucléosome. Les octamères d’histones recombinants ou purifiés constituent des éléments de base homogènes et prêts à l’emploi pour la reconstitution de la chromatine, la biologie structurale, les essais biophysiques, les études enzymatiques et le développement de tests. Disponibles sous forme d’octamères préassemblés (de type sauvage ou contenant des variants et/ou des modifications post-traductionnelles) ou sous forme de composants accompagnés de protocoles de repliement validés, ces réactifs permettent de gagner du temps et d’améliorer la reproductibilité des recherches sur les nucléosomes.

Caractéristiques principales

• Préassemblés et validés : Fournis sous forme d’octamères entièrement assemblés ou d’histones purifiées individuelles accompagnées de protocoles de repliement optimisés.
• Options de variants et de PTM : Disponibles sous forme d’octamères canoniques de type sauvage ainsi que d’octamères contenant des variants (H2A.Z, H2A.X, H3.3, CENP-A), ou portant des modifications post-traductionnelles (PTM) spécifiques à un site telles que l’acétylation, la méthylation, la phosphorylation et l’ubiquitination.
• Haute pureté et homogénéité : Purifiés par chromatographie et grâce à des procédures de repliement optimisées, avec des niveaux de pureté généralement supérieurs à 90–95 %, et validés par électrophorèse native (PAGE native), SDS-PAGE et spectrométrie de masse.
• Assemblage sur ADN défini : Compatibles avec la séquence de positionnement nucléosomique Widom 601, des fragments d’ADN personnalisés ou des séquences fournies par l’utilisateur pour l’assemblage de mononucléosomes et de réseaux de nucléosomes.
• Options marquées et modifiées : Disponibles avec des étiquettes épitopiques (His, FLAG), des sites de marquage spécifiques (cystéine unique) ou des fluorophores pour les études à molécule unique et les analyses basées sur le FRET.
• Contrôle qualité : Les analyses spécifiques à chaque lot comprennent la vérification de l’intégrité de l’octamère, de la stœchiométrie des histones, de la confirmation de la masse moléculaire et de l’efficacité fonctionnelle de l’assemblage des nucléosomes.

Applications courantes

• Reconstitution des nucléosomes : Assemblage de mononucléosomes et de réseaux de nucléosomes pour des études biochimiques, moléculaires et biophysiques.
• Biologie structurale : Réactifs essentiels pour les études par microscopie électronique cryogénique (cryo-EM) et cristallographie aux rayons X nécessitant des échantillons homogènes d’octamères présentant des états de modification définis.
• Essais de remodelage de la chromatine : Substrats pour les complexes de remodelage de la chromatine dépendants de l’ATP tels que SWI/SNF, ISWI et CHD, permettant l’étude du glissement, de l’éjection et de la cinétique de remodelage des nucléosomes.
• Essais enzymatiques : Substrats définis pour les enzymes modifiant les histones, notamment les histone acétyltransférases (HAT), les histone méthyltransférases (HMT), les kinases et les ubiquitine ligases, ainsi que pour le criblage de modulateurs de petites molécules.
• Études à molécule unique et analyses FRET : Octamères marqués par fluorescence adaptés aux expériences de smFRET, aux pinces optiques (optical tweezers), à la microscopie à force atomique (AFM) et à d’autres techniques biophysiques à haute résolution.
• Contrôles d’immunodosage et validation d’anticorps : Octamères standardisés utilisés pour valider les anticorps spécifiques des histones et des PTM, ainsi que pour calibrer les essais quantitatifs liés à la chromatine.