La coloration au Calcofluor White (Fluorescent Brightener 28) est un azurant optique fluorescent largement utilisé en recherche en sciences de la vie pour la visualisation rapide des polysaccharides à liaisons β, notamment la chitine, la cellulose et d'autres β-glucanes. Après liaison non covalente à ces polysaccharides structuraux, le colorant émet une intense fluorescence bleue sous excitation UV ou violette, ce qui en fait un fluorochrome de référence pour la microscopie à fluorescence et l'imagerie confocale. Bien qu'il soit principalement utilisé pour la coloration de la paroi cellulaire des champignons, le Calcofluor White est également employé en biologie végétale, en microbiologie, dans les études de la paroi cellulaire et en glycobiologie afin d'étudier l'architecture de la paroi, la morphogenèse, la cytocinèse et la distribution des polysaccharides. Étant donné que ce colorant se lie à plusieurs polysaccharides comportant des liaisons β, il présente une très grande sensibilité, mais ne doit pas être considéré comme spécifique de la chitine ou d'un polysaccharide particulier. Son protocole de coloration rapide et sa compatibilité avec les échantillons fixés, ainsi qu'avec des échantillons fongiques et végétaux vivants dans des conditions expérimentales optimisées, ont fait du Calcofluor White un fluorochrome de référence pour la visualisation qualitative de la paroi cellulaire dans les laboratoires de recherche.

Caractéristiques principales

• Coloration fluorescente à haute sensibilité : Marque rapidement les polysaccharides à liaisons β, notamment la chitine, la cellulose et d'autres β-glucanes.

• Fluorescence à fort contraste : Produit une intense fluorescence bleue après excitation par les UV ou à 405 nm, permettant une imagerie fluorescente à fort contraste.

• Compatible avec différentes techniques d'imagerie : Compatible avec la microscopie à fluorescence en champ large, la microscopie confocale et, dans des conditions expérimentales adaptées, l'imagerie sur échantillons vivants.

• Protocole de coloration rapide : Nécessite une préparation minimale des échantillons et permet une visualisation qualitative efficace des polysaccharides de la paroi cellulaire.

• Large compatibilité avec les échantillons : Adapté aux champignons, aux levures, aux végétaux, aux algues, aux oomycètes et à d'autres organismes contenant des polysaccharides à liaisons β.

Applications usuelles

• Coloration fluorescente des parois cellulaires fongiques pour l'étude de la morphologie, de la croissance et de la différenciation des champignons.

• Analyse du bourgeonnement des levures, de la formation du septum, de la cytocinèse et de l'organisation de la paroi cellulaire.

• Visualisation des parois cellulaires végétales, des tissus riches en cellulose et de l'architecture de la paroi cellulaire.

• Étude de la biosynthèse, du remodelage et de la distribution spatiale des polysaccharides à liaisons β au sein de la paroi cellulaire.

• Imagerie par fluorescence en microbiologie, mycologie, biologie végétale, glycobiologie et recherche sur la paroi cellulaire.