Les anticorps anti-cobaye conjugués à la PE (phycoérythrine) sont des immunoréactifs fluorescents hautement sensibles conçus pour la détection directe des immunoglobulines de cobaye. La phycoérythrine est reconnue comme l'un des fluorophores les plus brillants disponibles, offrant une intensité de fluorescence exceptionnelle avec une large plage d'excitation (496–564 nm) et un maximum d'émission d'environ 578 nm. Ces propriétés rendent les conjugués à la PE particulièrement adaptés aux analyses de fluorescence à haute sensibilité ainsi qu'aux expériences multiparamétriques (multicolores), avec un chevauchement spectral minimal.
Formats et spécificité
Les anticorps conjugués à la PE sont disponibles sous forme d'IgG entières (produites chez l'âne ou le lapin) et de fragments F(ab')2 (produits chez le lapin). Les anticorps IgG entiers reconnaissent les chaînes lourdes et légères (H+L) des IgG de cobaye, tandis que les fragments F(ab')2, dépourvus de région Fc, réduisent les interactions non spécifiques avec les récepteurs Fc et améliorent les performances lors du marquage des cellules vivantes. Leur spécificité est vérifiée par immunoélectrophorèse, démontrant une forte réactivité envers les IgG et les chaînes légères du cobaye, sans réactivité croisée détectable avec les protéines non immunoglobuliniques.
Applications et avantages
- Détection à haute sensibilité : Idéale pour les applications de cytométrie en flux, d'immunofluorescence, d'ELISA et de Western blot nécessitant des signaux fluorescents d'intensité élevée.
- Performances optimisées : Les dilutions de travail recommandées sont de 1:20 à 1:250 pour la cytométrie en flux, de 1:50 à 1:1 000 pour l'immunofluorescence, de 1:500 à 1:1 000 pour l'ELISA et de 1:300 à 1:5 000 pour le Western blot.
- Analyse multiparamétrique fiable : La luminosité exceptionnelle de la PE permet une détection précise des marqueurs de surface cellulaire faiblement exprimés tout en facilitant les analyses multicolores avec une interférence spectrale réduite.
Conservation
Ces anticorps sont généralement fournis dans un tampon PBS ou TBS contenant de la sérum albumine bovine (BSA) ainsi qu'un agent conservateur. Ils doivent être conservés à 4 °C pour une utilisation à court terme ou à −20 °C en présence de glycérol pour un stockage prolongé. Afin de préserver l'intensité de la fluorescence et la stabilité du conjugué, les échantillons doivent être protégés en permanence d'une exposition prolongée à la lumière.