Les anticorps anti-cobaye conjugués à la Cyanine 5.5 (Cy5.5) sont des immunoréactifs fluorescents émettant dans le proche infrarouge (NIR), conçus pour la détection hautement sensible des antigènes de cobaye dans les techniques avancées basées sur la fluorescence. Présentant un maximum d'excitation compris entre environ 675 et 683 nm et un maximum d'émission situé entre 694 et 703 nm, le fluorophore Cy5.5 fonctionne dans la fenêtre optique du proche infrarouge, une région spectrale où l'autofluorescence des tissus biologiques ainsi que la diffusion de la lumière sont fortement réduites. Ces propriétés optiques font de la Cy5.5 un fluorophore particulièrement adapté à l'imagerie de fluorescence multiplex, à la visualisation des tissus profonds ainsi qu'aux applications d'imagerie moléculaire in vivo.
Propriétés de fluorescence
La Cy5.5 possède un coefficient d'extinction molaire élevé (≈ 250 000 M-1cm-1) ainsi qu'un rendement quantique d'environ 0,27, garantissant une excellente intensité de fluorescence et une forte photostabilité. Comparée à la Cy5, sa longueur d'onde d'émission plus élevée améliore la pénétration des photons à travers les tissus biologiques tout en réduisant la fluorescence de fond, ce qui la rend particulièrement performante pour les applications d'imagerie dans le proche infrarouge.
Applications et avantages
- Large domaine d'application : Convient à la cytométrie en flux, à l'immunofluorescence, à l'immunohistochimie (IHC), à l'immunocytochemie (ICC), aux dosages ELISA ainsi qu'au Western blot.
- Imagerie in vivo : Son émission dans le proche infrarouge permet une meilleure pénétration dans les tissus et une diminution significative de l'autofluorescence, facilitant l'imagerie de fluorescence du corps entier et des tissus profonds.
- Fluorescence multiplex : Compatible avec d'autres fluorophores du proche infrarouge, tels que le Cy7, permettant la détection simultanée de plusieurs cibles biologiques avec un chevauchement spectral minimal.
- Conjugués tandem : Des conjugués PE/Cy5.5 sont disponibles pour les analyses multiparamétriques en cytométrie en flux. Ils permettent une excitation efficace à 488 nm tout en émettant une fluorescence autour de 695 nm.
