Alexa Fluor^® 647-konjugierte Anti-Pferd-Primärantikörper sind fernrote fluoreszierende Immunreagenzien, die für das Multiplexing und den Nachweis equiner Antigene mit geringem Hintergrund konzipiert sind. Sie werden durch Immunisierung von Wirten wie Ziege oder Kaninchen mit gereinigten Pferde-Immunglobulinen hergestellt, affinitätsgereinigt und kovalent an Alexa Fluor^® 647 konjugiert, einen kleinmolekularen Fluorophor mit Anregungs-/Emissionsmaxima von 650/665 nm. Dieser Fluorophor zeichnet sich durch außergewöhnliche Photostabilität, eine hohe Quantenausbeute (ca. 0,33) und stabile Fluoreszenz über einen weiten pH-Bereich (pH 4–10) aus und übertrifft damit traditionelle fernrote Farbstoffe wie Cy^®5. Sein fernrotes Emissionsspektrum minimiert die spektrale Überlappung mit Fluorophoren wie FITC und PE und reduziert die Autofluoreszenz von Gewebe und Fixiermitteln erheblich, wodurch es sich besonders gut für mehrfarbige Fluoreszenzanwendungen eignet.

Anwendungen

Alexa Fluor^® 647-Konjugate werden häufig in der Durchflusszytometrie und der fluoreszenzaktivierten Zellsortierung (FACS) eingesetzt, wo ihre hohe Helligkeit den empfindlichen Nachweis von equinen Oberflächenmarkern mit geringer Häufigkeit, einschließlich CD4, CD8 und MHC-Klasse-II-Molekülen, ermöglicht. In der konfokalen und Superauflösungsmikroskopie unterstützt ihre ausgezeichnete Photostabilität längere Bildaufnahme und Z-Stapel-Bildgebung mit minimalem Photobleaching. Diese Konjugate sind auch mit Nahinfrarot-Bildgebungsplattformen für in-vivo-Studien, Multiplex-Bead-basierten Assays zur Zytokinprofilierung und fluoreszierendem Western Blotting kompatibel, wo sie eine direkte Fluoreszenzdetektion ohne enzymatische Amplifikation bieten. Typische Arbeitsverdünnungen liegen je nach experimenteller Anwendung zwischen 1:100 und 1:2.000. Diese Produkte sind ausschließlich für Forschungszwecke bestimmt und nicht für diagnostische Verfahren konzipiert.