Label-basierte Antikörper-Arrays

Einführung

Mit den markenbasierten Antikörper-Arrays können Forscher nun eine breite, panoramische Ansicht der Zytokin-Expression erhalten. Die Expressionsniveaus von mehreren hundert Zielproteinen können gleichzeitig detektiert werden, einschließlich Zytokinen, Chemokinen, Wachstumsfaktoren, angiogenen Faktoren, Proteasen, löslichen Rezeptoren und anderen Proteinen in Zellkulturüberständen und anderen Körperflüssigkeiten. Darüber hinaus wird eine interne Kontrolle verwendet, um den gesamten Prozess, einschließlich der Biotinmarkierung, zu überwachen, sodass dieses massive Array die verfügbaren Zytokine in Ihrer Probe genau anzeigen kann.

Durch einen einfachen Prozess wird die Probe biotinyliert und dann dialysiert, um sich auf die Inkubation mit den Arrays vorzubereiten. Der Prozess ist einfach zu verstehen und umfasst die Biotinylierung der primären Amine der Proteine in der Probe. Ab hier wird die neu biotinylierten Probe entweder auf das Antikörper-Array auf Membran oder Glasfolie gegeben und bei Raumtemperatur inkubiert. Nach der Inkubation mit Streptavidin-konjugiertem HRP oder Streptavidin-konjugiertem Hilyte Fluor 555 können die Signale entweder durch Chemolumineszenz oder Fluoreszenz visualisiert werden.

Kit-Inhalt

• Dialyseschläuche und schwimmendes Rack
• Markierungsreagenz
• Stopp-Lösung
• Raybio® Biotinmarkierungsbasiertes Antikörper-Array auf Glasfolie mit Rahmen oder auf Membranen
• Blockierpuffer
• 20X Waschpuffer I
• 20X Waschpuffer II
• Streptavidin-konjugiertes HRP oder Streptavidin-konjugiertes Hilyte Fluor 555
• Adhäsivfolie
• Serumpuffer (nur in Glasfolie L-Series Kits)
• Spin-Säule

Wie es funktioniert



Assay-Diagramm

Proben werden vor dem Biotinmarkierungs-Schritt dialysiert. Durch einen einfachen Prozess wird das primäre Amin der Proteine in der Probe biotinyliert, gefolgt von einer Dialyse, um freies Biotin zu entfernen. Ab hier wird die neu biotinylierten Probe auf die Array-Membran oder Glasfolie gegeben und bei Raumtemperatur inkubiert. Nach der Inkubation mit Streptavidin-konjugiertem HRP oder Streptavidin-konjugiertem Fluor können die Signale entweder durch Chemolumineszenz oder Fluoreszenz visualisiert werden. Das experimentelle Verfahren ist einfach und kann in jedem Labor durchgeführt werden.

1. Zellkulturüberstand	2. Serum oder Plasma

Alle L-Series Antikörper-Arrays finden Sie hier