Webinar : Enzymatic Workflows for Protein Characterization

Dieses Webinar stellt einen integrierten enzymatischen Workflow für die umfassende strukturelle Charakterisierung therapeutischer Proteine vor, einschließlich monoklonaler Antikörper, Biosimilars und rekombinanter Proteine. Die Präsentation zeigt, wie PNGase F, Trypsin MS Grade und Carboxypeptidase B synergistisch zusammenwirken, um eine vollständige Proteinanalyse durch N-Glykan-Profiling, Peptid-Mapping mit Identifizierung posttranslationaler Modifikationen (PTM) und C-terminale Charakterisierung zu ermöglichen.

Bei der Entwicklung und Qualitätskontrolle von Biotherapeutika ist eine detaillierte Charakterisierung kritischer Qualitätsattribute (CQAs) essenziell, um Sicherheit, Wirksamkeit und Charge-zu-Charge-Konsistenz zu gewährleisten. Die N-Glykosylierung beeinflusst maßgeblich Pharmakokinetik, Effektorfunktionen und potenzielle Immunogenität und erfordert daher eine präzise Analyse der Glykan-Heterogenität mittels enzymatischer Freisetzung durch PNGase F und anschließender Analytik. Das Peptid-Mapping mittels hochreiner Trypsin-Verdauung bleibt eine zentrale Methode zur Bestätigung der Primärsequenz, zum Nachweis ortsspezifischer PTMs (z. B. Oxidation, Deamidierung, Glykosylierung) sowie zur Identifizierung von Sequenzvarianten oder Verkürzungen – wichtige Anforderungen für regulatorische Einreichungen bei neuartigen Therapeutika und Biosimilars. Ergänzend ermöglicht die Behandlung mit Carboxypeptidase B eine genaue Beurteilung der C-terminalen Heterogenität, einschließlich Lysin-Clipping, das Ladungsprofile und produktbezogene Verunreinigungen beeinflusst, die häufig mittels Ionenaustauschchromatographie oder Massenspektrometrie überwacht werden.

Dieser Multi-Enzym-Ansatz überwindet die Grenzen einzelner Methoden und liefert orthogonale, synergistische Daten, die robuste Vergleichbarkeitsstudien, Prozessoptimierung und die Einhaltung strenger regulatorischer Anforderungen (z. B. ICH Q6B-Richtlinien und Biosimilar-Ähnlichkeitsbewertungen) unterstützen. Die Teilnehmer erhalten Einblicke in die wissenschaftliche Begründung dieses Workflows, lernen die Interpretation der analytischen Ergebnisse jedes enzymatischen Schritts und verstehen dessen praktische Anwendung bei der Klärung CQAs, die für erfolgreiche Zulassungsverfahren und die Entwicklung biopharmazeutischer Produkte entscheidend sind.

Referent

Dr. Pavan Kumar Avula, PhD
Senior Manager – Techno Commercial, Provis Biolabs

Dr. Avula hat einen Doktortitel in Neurowissenschaften von der University of Melbourne und einen Master-Abschluss in Biotechnologie von der La Trobe University. Als Senior Manager bei Provis Biolabs ist er spezialisiert auf die Unterstützung analytischer Workflows zur Charakterisierung therapeutischer Proteine und arbeitet eng mit biopharmazeutischen Forschern und QC-Laboren zusammen. Seine Rolle verbindet wissenschaftliches Verständnis mit praktischer Umsetzungskompetenz.