Compensación de citometría de flujo

Compensación de citometría de flujo

Compensación en citometría de flujo es un proceso crucial que corrige el desbordamiento de señales fluorescentes entre canales debido a los espectros de emisión superpuestos de diferentes fluorocromos. Esta superposición puede llevar a una interpretación incorrecta de los datos, ya que las señales de múltiples fluorocromos pueden interferir entre sí, dificultando la distinción entre diferentes poblaciones celulares. Para lograr una compensación precisa, los investigadores suelen utilizar perlas de compensación y estándares de compensación.

Perlas de compensación son partículas sintéticas que emiten señales fluorescentes específicas y sirven como controles confiables para determinar los coeficientes de desbordamiento. Estas perlas están diseñadas para tener características de fluorescencia conocidas, lo que permite una calibración precisa de los instrumentos de citometría de flujo. Los estudios han demostrado que el uso de perlas de compensación puede agilizar el proceso de compensación, proporcionando resultados consistentes a lo largo de los experimentos, especialmente en ensayos policromáticos donde se usan varios fluorocromos simultáneamente.

Estándares de compensación, por otro lado, se refieren a los protocolos y controles establecidos que se utilizan durante el proceso de compensación. Estos estándares ayudan a garantizar que los ajustes de compensación se ajusten correctamente según las características específicas de los fluorocromos empleados en un experimento.

El uso tanto de perlas de compensación como de estándares mejora la fiabilidad de los datos de citometría de flujo al minimizar los errores asociados con el desbordamiento espectral.