Il ditiotreitolo (DTT) è un potente agente riducente comunemente usato per rompere i legami disolfuro delle proteine e stabilizzare enzimi e altre proteine. Ha un potenziale redox di -0,33 V a pH 7, che lo rende un agente riducente insolitamente forte. Il DTT partecipa alle reazioni di scambio disolfuro e viene utilizzato a concentrazioni di 1-10 mM per la riduzione dei legami disolfuro delle proteine. È anche in grado di attraversare le membrane biologiche. Il DTT è utilizzato per prevenire la formazione di specie miste di disolfuro ed è spesso impiegato per ridurre i legami disolfuro delle proteine e prevenire la formazione di legami disolfuro intramolecolari e intermolecolari tra i residui di cisteina delle proteine. Inoltre, il DTT può essere utilizzato come agente ossidante, con il vantaggio principale che non si formano specie di disolfuro misto, a differenza di altri agenti come il glutatione.