Kit ABC (complesso Avidina/Biotina)

Il principio dei kit di rilevazione ABC si basa sull'affinità dell'avidina (o della streptavidina) per la biotina. L'abbreviazione ABC sta infatti per Complesso Avidina/Biotina.
L'avidina è una glicoproteina basica di 68 kDa presente nell'albume d'uovo e nei tessuti di uccelli, rettili e anfibi. L'avidina ha una forte affinità per la biotina, una vitamina solubile di 34 kDa. La biotina può essere accoppiata a un'ampia varietà di molecole biologiche, come gli anticorpi, e più molecole di biotina possono essere legate a una proteina. La proteina biotinilata può quindi legarsi a più di una molecola di avidina. Uno svantaggio dell'avidina è il legame non specifico con strutture cariche negativamente come il nucleo delle cellule. L'uso della streptavidina riduce notevolmente questo legame aspecifico.
La streptavidina è isolata dallo Streptomyces avidinii ed è simile per dimensioni e affinità all'avidina biotina. Tuttavia, a differenza dell'avidina, la streptavidina non è glicosilata, il che rende le proteine meno inclini al legame non specifico nelle applicazioni immunoistochimiche.
In generale, i kit di rilevazione ABC sono composti da:
- un anticorpo secondario biotinilato
- Un complesso avidina/enzima
I kit possono contenere o meno i tamponi di blocco e di diluizione e il substrato, a seconda dei formati.