Anticorpi primari anti-cavallo coniugati con Alexa Fluor^® 647 sono immunoreagenti fluorescenti nel rosso lontano progettati per il multiplexing e il rilevamento di antigeni equini a basso fondo. Sono prodotti immunizzando ospiti come capra o coniglio con immunoglobuline di cavallo purificate, purificati per affinità e coniugati covalentemente ad Alexa Fluor^® 647, un fluoroforo a piccola molecola con massimi di eccitazione/emissione di 650/665 nm. Questo fluoroforo presenta un’eccezionale fotostabilità, un elevato rendimento quantico (circa 0,33) e una fluorescenza stabile in un ampio intervallo di pH (pH 4–10), superando i coloranti tradizionali nel rosso lontano come Cy^®5. Il suo spettro di emissione nel rosso lontano minimizza la sovrapposizione spettrale con fluorofori come FITC e PE, riducendo significativamente l’autofluorescenza di tessuti e fissativi, rendendolo particolarmente adatto per applicazioni di fluorescenza multicolore.

Applicazioni

I coniugati di Alexa Fluor^® 647 sono ampiamente utilizzati in citometria a flusso e separazione cellulare attivata da fluorescenza (FACS), dove la loro elevata luminosità consente il rilevamento sensibile di marcatori di superficie equini a bassa abbondanza, inclusi le molecole CD4, CD8 e MHC di classe II. Nella microscopia confocale e a super-risoluzione, la loro eccellente fotostabilità supporta l’acquisizione prolungata di immagini e l’imaging a stack Z con minimo fotobleaching. Questi coniugati sono inoltre compatibili con piattaforme di imaging nel vicino infrarosso per studi in vivo, saggi basati su bead multiplex per il profiling delle citochine e western blotting fluorescente, dove forniscono rilevamento fluorescente diretto senza amplificazione enzimatica. Le diluizioni di lavoro tipiche variano da 1:100 a 1:2.000 a seconda dell’applicazione sperimentale. Questi prodotti sono destinati esclusivamente all’uso per ricerca e non sono progettati per procedure diagnostiche.