L'interazione streptavidina-biotina è ampiamente utilizzata per aumentare la sensibilità dei saggi di immunorilevazione grazie alla sua affinità eccezionalmente elevata (Kd ≈ 10−14 M). Gli anticorpi primari anti-criceto coniugati con streptavidina sono reagenti immunochimici progettati per il rilevamento di antigeni target in campioni di origine criceto mediante sistemi di amplificazione biotina-streptavidina. Sono prodotti immunizzando specie ospiti come capra o coniglio con immunoglobuline di criceto purificate, purificati mediante cromatografia di immunoaffinità e coniugati con streptavidina, una proteina tetramerica derivata da Streptomyces avidinii. Questa coniugazione consente la successiva rilevazione utilizzando enzimi biotinilati, fluorofori o altre molecole reporter, fornendo un'efficace amplificazione del segnale. A seconda del prodotto, questi anticorpi possono riconoscere le catene pesanti e leggere delle immunoglobuline di criceto (H+L) o isotipi specifici di immunoglobuline. Molte formulazioni sono pre-adsorbite contro proteine sieriche di altre specie per minimizzare la reattività crociata e migliorare la specificità del saggio.
Applicazioni
Gli anticorpi primari anti-criceto coniugati con streptavidina sono ampiamente impiegati in immunoassaggi che richiedono una maggiore sensibilità attraverso l'amplificazione del segnale mediata dalla biotina. In immunoistochimica (IHC) e immunocitochimica (ICC), i sistemi di rilevazione streptavidina-biotina migliorano la visualizzazione degli antigeni in sezioni di tessuto e cellule coltivate. In ELISA e Western blotting, questi reagenti consentono il rilevamento sensibile e la quantificazione delle proteine target quando combinati con molecole di rilevazione biotinilate. Ulteriori applicazioni includono l'ibridazione in situ, la citometria a flusso e le tecnologie di array proteici. La diluizione ottimale dell'anticorpo deve essere determinata empiricamente per ciascun protocollo sperimentale. Questi reagenti sono destinati esclusivamente all'uso nella ricerca e non sono approvati per applicazioni diagnostiche o terapeutiche.
