Anticorpi anti-cavia coniugati con perossidasi di rafano (HRP) sono immunoreagenti enzimatici progettati per la rilevazione sensibile di antigeni di cavia in immunodosaggi colorimetrici e chemiluminescenti. La HRP catalizza la conversione del substrato per generare segnali di rilevazione amplificati, rendendo questi coniugati indispensabili per Western blot, ELISA e immunoistochimica (IHC).
Formati e specificità
Gli anticorpi coniugati con HRP sono disponibili come IgG intere, specifici per frammenti Fc o frammenti F(ab')₂ prodotti in ospiti capra o coniglio. Gli anticorpi IgG interi riconoscono sia le catene pesanti che quelle leggere (H+L), mentre i coniugati specifici per Fc si legano selettivamente alla regione Fc delle IgG di cavia. La specificità anticorpale viene validata mediante immunoelettroforesi ed ELISA, senza reattività rilevabile verso proteine sieriche non immunoglobuliniche. Le preparazioni con adsorbimento incrociato riducono ulteriormente il legame aspecifico alle immunoglobuline di altre specie.
Applicazioni e diluizioni consigliate
- Immunoistochimica (IHC) & Immunocitochimica (ICC): Diluizione consigliata di 1:500–1:5.000 per una colorazione sensibile di tessuti e cellule.
- Western blot & ELISA: Le diluizioni tipiche variano da 1:5.000–1:100.000 con substrati cromogenici e da 1:10.000–1:200.000 quando viene utilizzata la chemiluminescenza potenziata (ECL).
- Formati ottimizzati: I frammenti F(ab')₂ sono preferiti per applicazioni su cellule vive, poiché riducono al minimo le interazioni con i recettori Fc e diminuiscono il legame aspecifico.
Raccomandazioni per la conservazione
Questi coniugati vengono forniti come preparazioni liofilizzate o formulazioni liquide in PBS/BSA. I prodotti liofilizzati devono essere conservati a 2–8 °C e ricostituiti con acqua distillata (dH₂O) prima dell'uso. Per la conservazione a lungo termine, aliquotare l'anticorpo ricostituito e conservarlo a −20 °C in glicerolo al 50%. Non aggiungere azoturo di sodio poiché inibisce irreversibilmente l'attività enzimatica della HRP.
