Gli anticorpi primari anti-criceto coniugati con PerCP sono reagenti immunochimici progettati per il rilevamento basato sulla fluorescenza di antigeni target in campioni di origine criceto. Vengono prodotti immunizzando specie ospiti come capra o coniglio con immunoglobuline di criceto purificate, quindi purificati mediante cromatografia di immunoaffinità e coniugati al complesso proteico di clorofilla-peridinina (PerCP), un complesso pigmento-proteina fotosintetico isolato da dinoflagellati. Il PerCP presenta un’elevata resa quantica, un ampio Stokes shift e un massimo di emissione intorno a 675 nm, risultando compatibile con i canali standard di rilevamento della fluorescenza rossa. A seconda del reagente, la specificità dell’anticorpo può essere diretta contro le catene pesanti e leggere (H+L) o contro singoli isotipi di immunoglobuline. Molte formulazioni sono inoltre pre-adsorbite contro proteine sieriche di altre specie per minimizzare la reattività crociata e migliorare la specificità del saggio.
Applicazioni
Gli anticorpi primari anti-criceto coniugati con PerCP sono ampiamente utilizzati in immunoassaggi basati sulla fluorescenza. Nella citometria a flusso e nella citofluorimetria a cella attivata dalla fluorescenza (FACS) consentono il rilevamento quantitativo di antigeni di superficie cellulare e intracellulari e risultano particolarmente preziosi nei pannelli di colorazione multicolore grazie alle loro caratteristiche spettrali distintive. Nella microscopia a immunofluorescenza questi reagenti facilitano la visualizzazione e la localizzazione di antigeni target in sezioni di tessuto e cellule coltivate. Ulteriori applicazioni includono immunoassaggi multiplex basati su sfere e flussi di lavoro di high-content screening. Le concentrazioni ottimali di anticorpo devono essere determinate empiricamente per ciascuna applicazione sperimentale. Questi reagenti sono destinati esclusivamente all’uso nella ricerca e non sono approvati per procedure diagnostiche.
