Metanolo è un solvente polare prótico fondamentale in biochimica e biologia molecolare, apprezzato per la sua capacità di dissolvere biomolecole polari e alcune non polari, consentendo protocolli chiave di estrazione e precipitazione.

Proprietà chimiche

Il metanolo (CH₃OH) presenta una struttura tetraedrica con ibridazione sp³ al carbonio e ossigeno, generando un angolo di legame C-O-H di circa 108,5° a causa della repulsione del paio di elettroni solitario sull’ossigeno. Bolle a 64,7 °C, si congela a –97,6 °C e ha una densità di 0,792 g/mL. La sua elevata miscibilità con l’acqua e costante dielettrica di 32,6 favoriscono interazioni efficienti di legami a idrogeno in sistemi di solventi acquoso-organici.

Come alcol primario, il metanolo può essere ossidato enzimaticamente a formaldeide e formiato attraverso le vie dell’alcol deidrogenasi e aldeide deidrogenasi. Tuttavia, il metanolo di grado laboratoriale (come grado HPLC o ACS) viene purificato per minimizzare sottoprodotti contaminanti che potrebbero interferire con saggi analitici sensibili.

Applicazioni biochimiche

Nella biochimica dei lipidi, il metanolo è comunemente usato nel metodo di estrazione Folch (miscele cloroformio:metanolo come 2:1 v/v) per rompere le membrane biologiche e facilitare l’isolamento di fosfolipidi e glicolipidi per cromatografia su strato sottile o analisi di spettrometria di massa.

Il metanolo è anche impiegato in protocolli di biologia molecolare per la precipitazione di acidi nucleici, spesso dopo trattamento con etanolo (ad es. soluzioni 70–80 % v/v), per migliorare la purificazione di DNA e RNA prima di flussi di lavoro di sequenziamento di nuova generazione.

Nei flussi di lavoro di analisi proteica, il metanolo aiuta nella preparazione dei campioni per SDS-PAGE promuovendo la resolubilizzazione delle proteine e può essere usato nelle formulazioni di tampone per ELISA per stabilizzare strutture antigeniche senza causare denaturazione significativa.