Webinar : Enzymatic Workflows for Protein Characterization

Questo webinar presenta un flusso di lavoro enzimatico integrato per la caratterizzazione strutturale completa di proteine terapeutiche, inclusi anticorpi monoclonali, biosimilari e proteine ricombinanti. La presentazione dimostra come PNGase F, Trypsin MS Grade e Carboxypeptidase B agiscano in modo sinergico per consentire un'analisi completa della proteina attraverso il profiling dei N-glicani, il peptide mapping con identificazione delle modificazioni post-traduzionali (PTM) e la caratterizzazione del terminale C.

Nello sviluppo e nel controllo qualità dei bioterapeutici, la caratterizzazione dettagliata degli attributi critici di qualità (CQAs) è essenziale per garantire sicurezza, efficacia e consistenza tra i lotti. La N-glicosilation influenza profondamente la farmacocinetica, le funzioni effettrici e la potenziale immunogenicità, richiedendo un profiling preciso dell'eterogeneità dei glicani mediante rilascio enzimatico con PNGase F e successiva analisi. Il peptide mapping, facilitato dalla digestione con tripsina ad alta qualità, rimane una tecnica cardine per confermare l'integrità della sequenza aminoacidica primaria, rilevare PTM sito-specifiche (come ossidazione, deamminazione e glicosilazione) e identificare varianti di sequenza o troncamenti – requisiti fondamentali nelle presentazioni regolatorie sia per nuovi farmaci che per biosimilari. A complemento di questi passaggi, il trattamento con Carboxypeptidase B consente una valutazione accurata dell'eterogeneità del terminale C, inclusa la rimozione di lisina, che influisce sui profili di carica e sulle impurezze correlate al prodotto, spesso monitorate tramite cromatografia a scambio ionico o spettrometria di massa.

Questo approccio multi-enzimatico supera i limiti delle analisi a singolo metodo fornendo dati ortogonali e sinergici che supportano esercizi robusti di comparabilità, ottimizzazione dei processi e conformità a rigorosi requisiti regolatori (ad es. linee guida ICH Q6B e valutazioni di similarità per biosimilari). I partecipanti acquisiranno una comprensione del razionale scientifico alla base di questo flusso di lavoro, impareranno a interpretare i risultati analitici di ciascun passaggio enzimatico e comprenderanno l'applicazione pratica nella risoluzione dei CQAs critici per presentazioni regolatorie di successo e sviluppo biofarmaceutico.

Relatore

Dr. Pavan Kumar Avula, PhD
Senior Manager – Techno Commercial, Provis Biolabs

Il Dr. Avula è dottore di ricerca in Neuroscienze presso la University of Melbourne e ha conseguito un master in Biotecnologie presso la La Trobe University. In qualità di Senior Manager presso Provis Biolabs, si occupa di supportare i flussi di lavoro analitici per la caratterizzazione di proteine terapeutiche, collaborando strettamente con ricercatori biofarmaceutici e laboratori di controllo qualità. Il suo ruolo unisce una profonda comprensione scientifica a competenze pratiche di implementazione.