Les anticorps anti-cobaye conjugués à la FITC (isothiocyanate de fluorescéine) sont des immunoréactifs fluorescents conçus pour la détection directe des antigènes de cobaye dans un large éventail d'applications immunologiques. La FITC est l'un des fluorophores les plus largement utilisés pour le marquage des anticorps. Elle émet une fluorescence verte intense avec un maximum d'excitation d'environ 493 nm et un maximum d'émission d'environ 517 nm, ce qui la rend parfaitement compatible avec les instruments utilisant les lasers standards de 488 nm.
Formats et spécificité
Ces anticorps sont disponibles sous forme d'IgG entières ou de fragments Fab afin de répondre à différentes exigences expérimentales. Ils reconnaissent généralement les chaînes lourdes et légères (H+L) des IgG de cobaye, tandis que les formats adsorbés de manière croisée (cross-adsorbed) permettent de réduire la réactivité croisée avec les immunoglobulines provenant d'autres espèces. La spécificité des anticorps est systématiquement vérifiée par immunoélectrophorèse et par dosage ELISA, garantissant une détection des antigènes fiable et reproductible.
Applications
- Immunofluorescence : Permet la visualisation directe des antigènes de cobaye grâce à une fluorescence verte intense. Les dilutions de travail recommandées sont généralement comprises entre 1:100 et 1:250.
- Cytométrie en flux et immunocytochimie : Validés pour une détection fluorescente hautement sensible, avec des dilutions de travail généralement comprises entre 1:500 et 1:20 000 selon les conditions expérimentales.
- Applications utilisant des fragments Fab : Idéaux pour l'immunofluorescence directe et les dosages ELISA indirects, ils réduisent les interactions médiées par le fragment Fc et limitent les liaisons non spécifiques.
Conservation
Les anticorps conjugués à la FITC sont généralement fournis dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS) contenant de la sérum albumine bovine (BSA) et de l'azoture de sodium comme agent conservateur. Pour une stabilité optimale, ils doivent être conservés à 4 °C pour un stockage à court terme ou à −20 °C pour un stockage à long terme en présence de glycérol. Les conjugués doivent être protégés d'une exposition prolongée à la lumière et les cycles répétés de congélation-décongélation doivent être évités afin de préserver l'intensité de la fluorescence ainsi que les performances de l'anticorps.
