Anticorps fragmentés
Les anticorps secondaires sont des anticorps qui se lient à des anticorps primaires ou à des fragments d'anticorps.
Les anticorps secondaires fragmentés sont des anticorps qui ont été digérés enzymatiquement pour éliminer la région Fc de l'anticorps, ne laissant que les fragments Fab ou F(ab')2 liant l'antigène.
Ces fragments sont respectivement monovalents ou divalents et peuvent être utilisés pour bloquer les immunoglobulines endogènes sur les cellules, les tissus ou d'autres surfaces, et pour bloquer les immunoglobulines exposées dans des expériences de marquage multiples utilisant des anticorps primaires de la même espèce. Ils peuvent également être utilisés pour marquer les anticorps primaires avant l'incubation avec l'échantillon expérimental. Les avantages de l'utilisation d'anticorps secondaires fragmentés comprennent l'élimination de la liaison non spécifique entre les portions Fc des anticorps et les récepteurs Fc des cellules, une meilleure pénétration de l'antigène dans les tissus et la réduction du bruit de fond dû à la liaison de l'anticorps primaire dans les expériences de double coloration.
Les avantages de l'utilisation d'anticorps secondaires de type fragment Fab sont les suivants :
- Élimination de la liaison non spécifique entre les portions Fc des anticorps et les récepteurs Fc des cellules, ce qui est particulièrement important lorsque l'on travaille avec des cellules vivantes.
- Faciliter la pénétration de l'antigène dans les tissus, ce qui est important pour les expériences d'immunohistochimie (IHC).
- Réduire le bruit de fond dû à la liaison de l'anticorps primaire dans les expériences de double coloration.
- Permettre une conjugaison directe avec des étiquettes détectables par l'intermédiaire de leurs groupes sulfhydryles, en veillant à ce que le site de liaison actif de l'anticorps ne soit pas affecté.
