Les anticorps anti-cobaye conjugués à la HRP (peroxydase de raifort) sont des immunoréactifs enzymatiques conçus pour la détection sensible des antigènes de cobaye dans les immunodosages colorimétriques et chimioluminescents. La HRP catalyse la conversion de substrats afin de générer un signal amplifié, ce qui rend ces conjugués indispensables pour des techniques telles que le Western blot, l'ELISA et l'immunohistochimie (IHC).
Formats et spécificité
Les anticorps conjugués à la HRP sont disponibles sous forme d'IgG entières, de fragments spécifiques du domaine Fc ou de fragments F(ab')2, produits chez la chèvre ou le lapin. Les anticorps IgG entiers reconnaissent les chaînes lourdes et légères (H+L), tandis que les conjugués spécifiques du domaine Fc se lient sélectivement à la région Fc des IgG de cobaye. La spécificité des anticorps est validée par immunoélectrophorèse et par dosage ELISA, sans réactivité détectable vis-à-vis des protéines sériques non immunoglobuliniques. Les préparations adsorbées de manière croisée (cross-adsorbed) réduisent davantage les liaisons non spécifiques avec les immunoglobulines d'autres espèces.
Applications et dilutions recommandées
- Immunohistochimie (IHC) et immunocytochemie (ICC) : Dilution recommandée comprise entre 1:500 et 1:5 000 pour un marquage sensible des tissus et des cellules.
- Western blot et ELISA : Les dilutions de travail sont généralement comprises entre 1:5 000 et 1:100 000 avec des substrats chromogènes, et entre 1:10 000 et 1:200 000 lors de l'utilisation de la chimioluminescence renforcée (ECL).
- Formats optimisés : Les fragments F(ab')2 sont privilégiés pour les applications sur cellules vivantes, car ils limitent les interactions avec les récepteurs Fc et réduisent les liaisons non spécifiques.
Recommandations de conservation
Ces conjugués sont fournis soit sous forme lyophilisée, soit sous forme liquide dans un tampon PBS contenant de la sérum albumine bovine (BSA). Les produits lyophilisés doivent être conservés entre 2 et 8 °C et reconstitués avec de l'eau distillée (dH2O) avant utilisation. Pour une conservation à long terme, il est recommandé de répartir l'anticorps reconstitué en aliquotes et de le stocker à −20 °C dans une solution contenant 50 % de glycérol. L'ajout d'azoture de sodium est déconseillé, car ce composé inhibe de manière irréversible l'activité enzymatique de la HRP.
