Reverse transcriptase PCR - RT-PCR
La RT-PCR est une technique qui
permet de faire une PCR (réaction en chaîne par polymérase) à partir d'un
échantillon d'ARN. L'ARN est tout d'abord rétrotranscrit grâce à une enzyme
appelée transcriptase inverse, qui permet la synthèse de l'ADN complémentaire
(ADNc). Ce dernier est ensuite utilisé pour réaliser une PCR. La transcriptase
inverse ou rétrotranscriptase (en anglais reverse transcriptase ou encore RT)
est une enzyme utilisée par les rétrovirus et les rétrotransposons qui
transcrivent l'information génétique des virus ou rétrotransposons de l'ARN en
ADN, qui peut s'intégrer dans le génome de l'hôte.
La RT-PCR a été mise au point pour
utiliser les ARN comme matrice d'amplification de la PCR. Elle est certainement
la méthode la plus sensible pour détecter (et éventuellement quantifier), les
ARN messagers au niveau d'un organe, d'un tissu ou d'une cellule. Dans ce but
elle est souvent réalisée in situ (PCR in situ) c'est-à-dire sur du matériel
biologique fixé. Elle est également utilisée pour la construction de banques
d'ADNc, le tri d'ARNm (Differencial Display RT-PCR) ainsi que la construction
de sondes d'ADN.
