Kit pour la détermination de la croissance cellulaire

Kit pour la détermination de la croissance cellulaire

Dosage du MTT basé sur l'activité mitochondriale


La prolifération cellulaire s'est avérée avoir de multiples fonctions dans le développement et la formation cellulaire, y compris des rôles dans la croissance, la morphogenèse et l'expression des gènes.
Les méthodes couramment utilisées à cet effet sont le comptage par hémocytomètre, la détermination de la teneur en protéines, la mesure du poids humide ou sec, et la détermination de la densité optique (OD). Bien que le comptage par hémocytomètre et la détermination des protéines aient l'inconvénient d'être longs et fastidieux, la mesure du poids humide ou même sec n'est pas pratique pour de très petits volumes de culture.
Une méthode alternative est basée sur la transformation et la quantification colorimétrique du bromure de MTT [3- (4,5-diméthylthiazol-2-yl) -2,5-diphényltétrazolium. La chaîne respiratoire et d'autres systèmes de transport d'électrons réduisent le MTT et d'autres sels de tétrazolium et forment ainsi des cristaux de formazan violets non hydrosolubles à l'intérieur de la cellule. La quantité de ces cristaux peut être déterminée par spectrophotométrie et sert d'estimation du nombre de mitochondries et donc du nombre de cellules vivantes dans l'échantillon. Ces caractéristiques peuvent être mises à profit dans des tests de cytotoxicité ou de prolifération cellulaire, qui sont largement utilisés en immunologie, en toxicologie et en biologie cellulaire.

Principe :
Le principe du test MTT est basé sur l'activité mitochondriale. Pour les cellules viables, l'activité mitochondriale est constante et ainsi une augmentation ou une diminution du nombre de cellules viables est linéairement liée à l'activité mitochondriale. L'activité mitochondriale des cellules est corrélée avec la conversion du sel de tétrazolium MTT en cristaux de formazan qui peuvent être solubilisés pour une mesure homogène. Ainsi, toute augmentation ou diminution du nombre de cellules viables peut être détectée en mesurant la concentration de formazan par spectrophotométrie en utilisant un lecteur de plaques à 570 nm contre 690 nm.

Composants du kit :
MTT solution + MTT solvent


Réduction du MTT en formazan
Retrouvez tous nos kits MTT ICI