Immunoessais : Dites NON aux interférences !

Immunoessais : Dites NON aux interférences !

Assay Defender® - Blocage total des HAMA et des interférences

Assay Defender®  est un diluant de test prêt à l'emploi pour la réduction des interférences causées par les HAMA (anticorps humains anti-souris), les facteurs rhumatoïdes, les liaisons non spécifiques, les réactivités croisées et les effets de matrice.
Assay Defender® est particulièrement adapté aux spécimens humains ou animaux contenant des HAMA (anticorps humains anti-souris), des AAA (anticorps anti-animaux) ou d'autres anticorps de haute affinité.

Assay Defender® peut être utilisé comme tampon de dilution d'échantillon pour différentes applications telles que ELISA, les tests de flux latéral ou les tests à base de billes.

Assay Defender® est prêt à l'emploi et disponible en flacons de 50 ml, 125 ml et 500 ml.            

Raison de l'interférence :

Les interférences dans les immunoessais peuvent provoquer des résultats faussement positifs et faussement négatifs dans les tests de routine. Les raisons de la prévalence croissante de différents types d'interférences sont par exemple :
  • un nombre croissant de patients atteints de maladies auto-immunes chroniques
  • maladies allergiques et inflammatoires
  • une meilleure limite de détection dans les tests modernes
  • un plus grand nombre d'applications des formats de tests sandwiches

Les interférences peuvent être classées en fonction de leurs raisons biochimiques et de leur impact sur les performances du test.

Interférence causée par des anticorps provenant d'échantillons de patients
e.g. HAMA (anticorps humains anti-souris), HAAA (anticorps humains anti-animaux), anticorps hétérophiles et facteurs rhumatoïdes à partir d'échantillons de patients
 
Interférence causée par les composants endogènes de l'échantillon
e.g. albumines, complément, lysozyme, fibrinogène, α-1 Antitrypsine, concentrations de lipides, de sel ou de sucre atypiquement élevées ainsi que viscosités atypiques.
 
Interférence causée par les composants de l'essai
Les composants du test - comme les marqueurs fluorescents ou enzymatiques - peuvent réagir de manière croisée avec les substances de l'échantillon ou modifier les propriétés de liaison des anticorps du test.
Contrairement aux bloqueurs HAMA classiques, Assay Defender® permet d'éliminer efficacement tous les types d'interférences et contribue à prévenir les résultats faussement positifs ou faussement négatifs.


Essai sandwich normal sans interférence → résultat correct
Un anticorps interférent forme un pont entre l'anticorps de capture et l'anticorps de détection → résultat faussement positif.
Liaison des anticorps interférents à l'anticorps de capture → résultat faussement négatif.


Liaison des anticorps interférents à l'anticorps de détection → résultat faussement négatif.
Les composants de Assay Defender® empêchent la liaison de l'anticorps interférent → résultat correct.


Uitlisation de Assay Defender®

Assay Defender® est particulièrement adapté aux spécimens humains ou animaux contenant des HAMA (anticorps humains anti-souris) ou d'autres AAA (anticorps anti-animaux).
Assay Defender® est un tampon de dilution prêt à l'emploi pour les échantillons de liquides organiques humains ou animaux. Le tampon de dilution précédemment utilisé peut être facilement remplacé par Assay Defender®. Les calibrateurs
doivent également être dilués dans Assay Defender®. La dilution dans Assay Defender® peut être de 1: 2 ou plus. Un facteur de dilution utile pour la plupart des applications est de 1: 10 (1 partie d'échantillon + 9 parties d'Assay Defender®).

Assay Defender® excelle dans la prévention des résultats faussement positifs dans les échantillons interférents. 
Des échantillons de sérum provenant de patients atteints de maladies rhumatoïdes (échantillons 1 et 2) ont été analysés à l'aide d'un test ELISA de recherche établi pour la détection de hAxl, un biomarqueur du carcinome hépatocellulaire.
L'échantillon 3 est un échantillon sans interférence provenant d'un donneur sain. Les échantillons ont été dilués soit dans du PBS-T/BSA pur, soit dans du PBS-T/BSA complété par un bloqueur HAMA disponible dans le commerce (HAMA
Blocker 3), des diluants bloqueurs de HAMA disponibles dans le commerce et prêts à l'emploi (HAMA Blocker 1 et HAMA Blocker 2), ou l'Assay Defender® de CANDOR. Assay Defender® seul peut éliminer complètement
les interférences et donc donner un vrai résultat négatif (< 25 ng/mL) dans les deux échantillons avec interférences. Les résultats des échantillons sans interférence ne sont pas affectés par Assay Defender®.