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Le Western blot est une technique de laboratoire largement utilisée pour détecter et quantifier des protéines spécifiques dans des échantillons biologiques complexes. Cette méthode comprend généralement la séparation des protéines par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS (SDS-PAGE) , leur transfert sur une membrane et la détection des protéines cibles à l'aide d'anticorps . La détection repose souvent sur des réactions enzymatiques produisant un signal mesurable, comme la chimiluminescence.
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En Western blot, les anticorps primaires détectent les protéines cibles à la surface de la membrane, tandis que des protéines de référence comme la GAPDH et la β-actine servent de témoins de charge. Un anticorps secondaire conjugué à la peroxydase (HRP) réagit avec un substrat de HRP pour produire un signal luminescent, et des marqueurs de poids moléculaire, tels que des échelles de protéines, permettent une estimation précise de la taille des protéines.
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