Boyden kamer

 
De Boydenkamer is een nuttig instrument om celmigratie en celinvasie te bestuderen. Hij bestaat uit een cilindrische celcultuurinzet die in de put van een celkweekplaat is genest. Het inzetstuk bevat een polycarbonaatmembraan aan de onderkant met een gedefinieerde poriegrootte.
Cellen worden in de bovenkant van het inzetstuk in serumvrije media gezaaid, terwijl serum of vergelijkbare chemoaantrekkers in de well eronder worden geplaatst. Migrerende cellen bewegen door de poriën naar het chemoaantrekkende middel eronder en kunnen worden gekleurd of gekwantificeerd in een plaatlezer. Invasieve cellen kunnen op vergelijkbare wijze worden gemeten door een coating van extracellulaire matrixproteïnen op het membraan aan te brengen.
Boyden Chamber Assays kunnen worden gebruikt om celinvasie en verschillende soorten celmigratie te meten:
  • Chemotaxis beschrijft celmigratie op basis van chemische stoffen in de omgeving van een cel. Celchemotaxis kan migratie aangeven naar of weg van een bepaald chemisch signaal.
  • Haptotaxis wordt gedefinieerd als celmigratie langs een gradiënt van extracellulaire matrixgebonden chemoattractanten. In deze assays is het Boyden-kamerinzetstuk aan de onderkant gecoat met Collageen I of Fibronectine-eiwit.
  • Transmigratie beschrijft de migratie van cellen (meestal leukocyten of tumorcellen) door het vasculaire endotheel in de richting van een chemoattractant.
     

 

Type test
Celtypen
Poriëngrootte
Coating
Formaten
Chemotaxis
Leukocyten
3 µm
Geen
24 putjes
   
Neutrofielen
   
   
96 putjes
   
Lymfocyten
5 µm
Geen
24 putjes
   
Macrofagen
   
   
96 putjes
   
Monocyten
   
   
   
   
Endotheelcellen
8 µm
Geen
24 putjes
   
Epitheelcellen
   
   
96 putjes
   
Fibroblasten
   
   
   
   
Tumorcellen
   
   
   
   
Astrocyten
12 µm
Geen
24 putjes
   
Langzaam bewegende cellen
   
   
   
Haptotaxis
Endotheelcellen
8 µm
Collageen I (onder)
24 putjes
   
Epitheelcellen
   
   
   
   
Fibroblasten
   
Fibronectine (onder)
24 putjes
Transmigratie
Leukocyten
3 µm
Geen
24 putjes
   
Tumorcellen
8 µm
Geen
24 putjes
Invasie                                                           
Endotheelcellen
Epitheelcellen
8 µm                                             
Extracellulaire matrix (boven)
24 putjes
96 putjes
                                                                     
Fibroblasten
Tumorcellen
                                                 
Collageen I (boven)                    
24 putjes
96 putjes
                                                                          
                                                                     
                                                 
Laminine I (boven)                      
24 putjes
96 putjes