Alexa Fluor® 647-geconjugeerde anti-paard primaire antilichamen zijn verrood fluorescerende immunoreagentia ontworpen voor multiplexing en detectie van equiene antigenen met lage achtergrond. Ze worden geproduceerd door gastheren zoals geit of konijn te immuniseren met gezuiverde paardenimmunoglobulinen, affiniteitsgezuiverd en covalent geconjugeerd aan Alexa Fluor® 647, een klein-moleculaire fluorofoor met excitatie-/emissiemaxima van 650/665 nm. Deze fluorofoor vertoont uitzonderlijke fotostabiliteit, een hoge kwantumopbrengst (ongeveer 0,33) en stabiele fluorescentie over een breed pH-bereik (pH 4–10), en presteert beter dan traditionele verrode kleurstoffen zoals Cy®5. Het verrode emissiespectrum minimaliseert spectrale overlapping met fluoroforen zoals FITC en PE en vermindert significant de autofluorescentie van weefsel en fixatieven, waardoor het bijzonder geschikt is voor meerkleurige fluorescentietoepassingen.
Toepassingen
Alexa Fluor® 647-conjugaten worden veel gebruikt in flowcytometrie en fluorescentie-geactiveerde celsortering (FACS), waar hun hoge helderheid de gevoelige detectie mogelijk maakt van equiene oppervlaktemarkers met lage abundantie, waaronder CD4, CD8 en MHC klasse II-moleculen. In confocale en superresolutiemicroscopie ondersteunt hun uitstekende fotostabiliteit langdurige beeldacquisitie en z-stapelbeeldvorming met minimale fotobleking. Deze conjugaten zijn ook compatibel met nabij-infrarood beeldvormingsplatforms voor in vivo-studies, multiplex bead-gebaseerde assays voor cytokineprofilering en fluorescente western blotting, waar ze directe fluorescentiedetectie bieden zonder enzymatische amplificatie. Typische werkverdunningen variëren van 1:100 tot 1:2.000, afhankelijk van de experimentele toepassing. Deze producten zijn uitsluitend bedoeld voor onderzoeksgebruik en zijn niet ontworpen voor diagnostische procedures.
