De streptavidine-biotine-interactie wordt veel gebruikt om de gevoeligheid van immunodetectie-assays te verhogen vanwege de uitzonderlijk hoge affiniteit (Kd ≈ 10−14 M). Streptavidine-geconjugeerde anti-hamster primaire antilichamen zijn immunochemische reagentia die zijn ontworpen voor de detectie van doelantigenen in van hamster afgeleide monsters via biotine-streptavidine-amplificatiesystemen. Ze worden geproduceerd door gastheersoorten zoals geit of konijn te immuniseren met gezuiverde hamsterimmunoglobulinen, gezuiverd door immunoaffiniteitschromatografie en geconjugeerd met streptavidine, een tetramerisch eiwit afkomstig van Streptomyces avidinii. Deze conjugatie maakt daaropvolgende detectie mogelijk met gebiotinyleerde enzymen, fluoroforen of andere reportermoleculen, wat zorgt voor efficiënte signaalamplificatie. Afhankelijk van het product herkennen deze antilichamen zware en lichte ketens van hamsterimmunoglobulinen (H+L) of specifieke immunoglobuline-isotypen. Veel formuleringen zijn vooraf geadsorbeerd tegen serumeiwitten van andere soorten om kruisreactiviteit te minimaliseren en de specificiteit van de assay te verbeteren.
Toepassingen
Streptavidine-geconjugeerde anti-hamster primaire antilichamen worden veel gebruikt in immunoassays die een verhoogde gevoeligheid vereisen door biotine-gemedieerde signaalamplificatie. In immunohistochemie (IHC) en immunocytochemie (ICC) verbeteren streptavidine-biotine-detectiesystemen de visualisatie van antigenen in weefselcoupes en gekweekte cellen. In ELISA en Western blotting maken deze reagentia gevoelige detectie en kwantificering van doeleiwitten mogelijk wanneer ze worden gecombineerd met gebiotinyleerde detectiemoleculen. Extra toepassingen omvatten in situ-hybridisatie, flowcytometrie en eiwitarray-technologieën. De optimale antilichaamverdunning moet empirisch worden bepaald voor elk experimenteel protocol. Deze reagentia zijn uitsluitend bedoeld voor onderzoeksgebruik en zijn niet goedgekeurd voor diagnostische of therapeutische toepassingen.
