Chromatografieharsen

Chromatografieharsen

 
Het principe van chromatografie is gebaseerd op 2 fasen: de mobiele fase die het monster aandrijft en de stationaire fase die de zuivering mogelijk maakt. De chromatografieharsen vormen deze stationaire fase.
Er zijn verschillende soorten chromatografie, afhankelijk van het type hars dat wordt gebruikt. De vier belangrijkste soorten chromatografie zijn affiniteitschromatografie, ionenuitwisselingschromatografie (IEX), hydrofobe interactiechromatografie (HIC) en grootte-uitsluitingschromatografie (SEC). De meeste zuiveringssystemen vereisen het gebruik van meerdere van deze typen chromatografische procedures om de zuiverheid te bereiken die nodig is voor downstream toepassingen. De keuze van de meest geschikte chromatografische methode(n) en de volgorde van deze methoden is essentieel bij de optimalisatie van een eiwitzuiveringsmethode.
 
Type chromatografie Scheidingsprincipe     Interactie     Elutie
Affiniteit     Specifieke interactie     Geen concurrerend ligand     Concurrerend ligand (specifiek), afbraak van eiwit/eiwit interacties door verandering van omstandigheden (niet-specifiek)
Ionenwisseling     Netto oppervlaktelading Lage ionensterkte     Hoge ionensterkte, toenemende (kationen) of afnemende (anionen) pH
Hydrofobe interacties     Hydrofobiciteit     Hoge ionensterkte Lage ionensterkte
Grootte uitsluiting     Hydrodynamische straal