Webinar : Enzymatic Workflows for Protein Characterization

Dit webinar presenteert een geïntegreerde enzymatische workflow voor de uitgebreide structurele karakterisering van therapeutische eiwitten, waaronder monoklonale antilichamen, biosimilars en recombinante eiwitten. De presentatie toont hoe PNGase F, Trypsin MS Grade en Carboxypeptidase B synergetisch samenwerken om een volledige eiwitanalyse mogelijk te maken via N-glycaanprofilering, peptide mapping met identificatie van post-translationele modificaties (PTM) en C-terminale karakterisering.

Bij de ontwikkeling en kwaliteitscontrole van biotherapeutica is een gedetailleerde karakterisering van kritische kwaliteitsattributen (CQAs) essentieel om veiligheid, werkzaamheid en consistentie tussen batches te waarborgen. N-glycosylering heeft een grote invloed op farmacokinetiek, effectorfuncties en mogelijke immunogeniciteit, waardoor een nauwkeurige profilering van glycaan-heterogeniteit vereist is met behulp van enzymatische vrijmaking door PNGase F en daaropvolgende analyse. Peptide mapping, gefaciliteerd door hoogwaardige trypsine-digestie, blijft een hoeksteen-techniek om de integriteit van de primaire aminozuursequentie te bevestigen, locatiespecifieke PTMs (zoals oxidatie, deamidatie en glycosylering) te detecteren en sequentievarianten of truncaties te identificeren – belangrijke vereisten voor regelgevende indieningen bij zowel nieuwe therapeutica als biosimilars. Aanvullend maakt behandeling met Carboxypeptidase B een nauwkeurige beoordeling van C-terminale heterogeniteit mogelijk, inclusief lysine-clipping, wat ladingprofielen en productgerelateerde onzuiverheden beïnvloedt die vaak worden gemonitord via ionenwisselchromatografie of massaspectrometrie.

Deze multi-enzymatische aanpak overwint de beperkingen van enkelvoudige methoden door orthogonale, synergetische gegevens te leveren die robuuste vergelijkbaarheidsstudies, procesoptimalisatie en naleving van strenge regelgevende eisen ondersteunen (bijv. ICH Q6B-richtlijnen en biosimilar-gelijkwaardigheidsbeoordelingen). Deelnemers krijgen inzicht in de wetenschappelijke onderbouwing van deze workflow, leren de analytische resultaten van elke enzymatische stap interpreteren en begrijpen de praktische toepassing ervan bij het oplossen van CQAs die cruciaal zijn voor succesvolle regelgevende indieningen en biofarmaceutische ontwikkeling.

Spreker

Dr. Pavan Kumar Avula, PhD
Senior Manager – Techno Commercial, Provis Biolabs

Dr. Avula heeft een PhD in Neurowetenschappen van de University of Melbourne en een masterdiploma in Biotechnologie van La Trobe University. Als Senior Manager bij Provis Biolabs is hij gespecialiseerd in het ondersteunen van analytische workflows voor de karakterisering van therapeutische eiwitten en werkt hij nauw samen met biofarmaceutische onderzoekers en QC-laboratoria. Zijn rol combineert wetenschappelijk begrip met praktische implementatie-expertise.