Anticorpos anti-cobaia conjugados com FITC (isotiocianato de fluoresceína) são imunorreagentes fluorescentes desenvolvidos para a deteção direta de antigénios de cobaia numa ampla variedade de aplicações imunológicas. O FITC é um dos fluoróforos mais utilizados para a marcação de anticorpos, produzindo uma fluorescência verde intensa com um máximo de excitação de aproximadamente 493 nm e um máximo de emissão de aproximadamente 517 nm, tornando-o totalmente compatível com instrumentos padrão baseados em laser de 488 nm.
Formatos e especificidade
Estes anticorpos estão disponíveis como IgG completa ou fragmentos Fab para responder a diferentes requisitos experimentais. Normalmente reconhecem as cadeias pesadas e leves (H+L) da IgG de cobaia, enquanto os formatos com adsorção cruzada ajudam a minimizar a reatividade cruzada com imunoglobulinas de outras espécies. A especificidade dos anticorpos é verificada rotineiramente por imunoeletroforese e ELISA, garantindo uma deteção de antigénios fiável e reprodutível.
Aplicações
- Imunofluorescência: Permite a visualização direta de antigénios de cobaia através de fluorescência verde intensa, normalmente utilizada em diluições entre 1:100 e 1:250.
- Citometria de fluxo e imunocitoquímica: Validado para deteção fluorescente sensível, com diluições de trabalho recomendadas geralmente entre 1:500 e 1:20.000, dependendo das condições do ensaio.
- Aplicações com fragmentos Fab: Ideais para imunofluorescência direta e ELISA indireto, reduzindo interações mediadas por Fc e minimizando ligações não específicas.
Armazenamento
Os anticorpos conjugados com FITC são normalmente fornecidos em solução salina tamponada com fosfato (PBS) contendo albumina sérica bovina (BSA) e azida de sódio como conservante. Para uma estabilidade ideal, armazenar a 4°C para utilização a curto prazo ou a −20°C para armazenamento prolongado na presença de glicerol. Proteger os conjugados da exposição prolongada à luz e evitar ciclos repetidos de congelamento-descongelamento para preservar a intensidade da fluorescência e o desempenho do anticorpo.
