Kits de deteção IHC à base de polímeros - Tecidos humanos - IgG anti-humana

Os sistemas de deteção IHC baseados no método dos polímeros consistem num polímero de uma enzima ativa ligada a um anticorpo secundário específico para um anticorpo primário alvo. Este formato permite aumentar significativamente a quantidade de enzima presente no local de localização e, por conseguinte, um maior sinal através da conversão de uma maior quantidade de substrato em precipitado. Além disso, este sistema permite um protocolo de um passo em vez de dois com o sistema ABC (anticorpo biotinilado + complexo avidina-enzima).

A deteção de antigénios com anticorpos primários da mesma espécie que o tecido testado produz um fundo elevado quando se utiliza o método de deteção indireta. Este facto limita severamente a utilização de anticorpos humanos de rastreio em tecidos humanos. Os nossos kits foram concebidos para a coloração de anticorpos primários humanos em tecidos humanos sem coloração de fundo. O kit NeoKlear Human HRP-Polymer Detection fornece tampões de bloqueio especiais, anticorpo secundário polimérico ligado à HRP, bem como iniciador humano num sistema pronto a utilizar. Esta tecnologia requer uma pré-incubação nocturna com o anticorpo primário, o que resulta numa excelente sensibilidade e numa elevada especificidade. Trata-se de um sistema isento de biotina, pelo que supera a coloração não específica causada pelo sistema estreptavidina/biotina devido às biotinas endógenas.

 

Os substratos de fosfatase alcalina mais utilizados são o Fast Red e o Permanent Red. Estes dois substratos formam precipitados vermelhos insolúveis em água quando hidrolisados pela fosfatase alcalina (AP). É por esta razão que são vulgarmente designados por cromogéneos. A localização das proteínas alvo é então efectuada através da visualização microscópica dos precipitados no tecido.

 

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