Kits de détection polymères IHC - Tissus humains - Multi-espèces - Phosphatase alcaline (AP)

Kits de détection polymères IHC - Tissus humains - Multi-espèces - Phosphatase alcaline (AP)


Les kits de détection pour l'immunohistochimie (IHC) basés sur la méthode des polymères sont plus récents que les kits traditionnels utilisant des conjugués avidine et biotine comme les kits ABC. Les kits à base de polymères offrent plusieurs avantages par rapport aux kits ABC, en particulier pour les applications de marquages multiples (multiplex) sur une même coupe de tissu ou lorsque les niveaux élevés de biotine endogène peuvent poser problème.
Les systèmes de détection IHC basés sur la méthode des polymères consistent en un polymère d'une enzyme active lié à un anticorps secondaire spécifique d'un anticorps primaire cible. Ce format permet d'augmenter de façon significative la quantité d'enzyme présente au niveau du site de localisation, et donc un signal plus important grâce à la transformation d'une plus grande quantité de substrat en précipité. De plus, ce système permet un protocole en une étape au lieu de deux avec le système ABC (anticorps biotinylé + complexe avidine - enzyme).
Les polymères peuvent être à base de dextran ou de molécules similaires qui ont une taille importante (ce qui poser problème dans certains tissus) ou de micro-polymères qui pénètrent plus facilement dans les sections de tissus.
Les kits de détection polymère multi-espèces sont conçus pour détecter des anticorps primaires de souris et de lapin, ils contiennent des anticorps secondaires anti-IgG de souris et de lapin couplés à un polymère de molécules de phosphatase alcaline ou de HRP.
Les kits peuvent contenir ou non les tampons de blocages et de dilutions et le substrat en fonction des formats.

Les substrats de la phosphatase alcaline les plus couramment utilisés sont le Fast Red et le Permanent Red. Ces 2 substrats forment des précipités rouges insolubles dans l'eau lorsqu'ils sont hydrolysés par la phosphatase alcaline (AP). C'est pour cette raison qu'on les appelle communément des chromogènes. La localisation des protéines cibles se fait ensuite par visualisation en microscopie des précipités au sein du tissu.

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