Anticorpi primari anti-cavia coniugati con PerCP combinano la specificità degli anticorpi anti-immunoglobulina di cavia con il fluoroforo naturale Complesso Proteico Peridinina-Clorofilla (PerCP). Originariamente isolato da dinoflagellati fotosintetici, il PerCP è caratterizzato da una forte eccitazione intorno a 482 nm e da una brillante emissione rossa lontana vicino a 675 nm, rendendolo ideale per applicazioni di fluorescenza multicolore utilizzando citometri a flusso dotati di laser standard a 488 nm.
Caratteristiche del coniugato e specificità
Gli anticorpi anti-cavia coniugati con PerCP sono tipicamente anticorpi policlonali purificati per affinità prodotti in ospiti di capra o coniglio. La maggior parte delle preparazioni riconosce sia le catene pesanti che quelle leggere (H+L) delle IgG di cavia, mentre sono disponibili anche formati specifici per Fc per eliminare il legame con i frammenti F(ab')₂. La coniugazione ottimizzata preserva sia la specificità dell'anticorpo che le proprietà di fluorescenza del PerCP, fornendo un'intensità di segnale affidabile riducendo al minimo l'ingombro sterico e le interazioni non specifiche.
Applicazioni
- Citometria a flusso: Utilizzato principalmente come reagente di rilevamento secondario per l'immunofenotipizzazione e l'analisi citometrica a flusso multicolore. Il PerCP viene eccitato efficacemente dal laser a 488 nm ed emette nella regione rossa lontana, consentendo un'eccellente separazione spettrale da fluorofori come FITC e PE.
- Saggi di fluorescenza multiplex: Adatto per applicazioni di immunofluorescenza in cui la sua emissione a lunga lunghezza d'onda supporta il rilevamento simultaneo di più bersagli con sovrapposizione spettrale ridotta.
