NeoPRO Nano Western ECL Substrate

Le NeoPRO Nano Western ECL Substrate est un substrat chimiluminescent à deux composants conçu pour le Western blot et la détection des protéines basée sur la HRP. Il permet une détection à un niveau de l'ordre du picogramme moyen et est destiné aux applications de Western blot de routine nécessitant une détection chimiluminescente fiable des protéines cibles.

Le substrat repose sur un système de détection chimiluminescente dérivé du luminol. L'oxydation catalysée par la peroxydase génère de la lumière, tandis que les composants réactionnels intégrés à la formulation augmentent l'intensité et la durée du signal. Cela permet de détecter les protéines immobilisées sur les membranes de Western blot après incubation avec les anticorps.

Le NeoPRO Nano Western ECL Substrate est fourni sous la forme d'un kit à deux solutions contenant une solution de dérivé du luminol/activateur et une solution de peroxyde. Les deux solutions sont mélangées selon un rapport de 1: 1 immédiatement avant utilisation afin de préparer la solution de travail.

Le substrat peut être utilisé dans les protocoles standards de Western blot comprenant l'électrophorèse SDS-PAGE, le transfert sur membrane, le blocage et la détection à l'aide d'anticorps conjugués à la HRP. Les plages de dilution recommandées pour les anticorps et la procédure contrôlée de détection chimiluminescente constituent un point de départ pratique pour la détection de protéines à un niveau de l'ordre du picogramme moyen.

• Substrat chimiluminescent à deux composants pour le Western blot
• Conçu pour la détection des protéines à un niveau de l'ordre du picogramme moyen
• Détection chimiluminescente dépendante de la HRP
• Solution de dérivé du luminol/activateur et solution de peroxyde fournies séparément
• Solution de travail préparée en mélangeant les deux composants selon un rapport de 1: 1
• Adapté aux applications de Western blot de routine
• Compatible avec les anticorps secondaires conjugués à la HRP
• Compatible avec l'acquisition de signaux chimiluminescents à l'aide de systèmes d'imagerie ou de films autoradiographiques
• Dilution recommandée de l'anticorps primaire : 1: 100–1: 5 000
• Dilution recommandée de l'anticorps secondaire : 1: 1 000–1: 15 000
• Réservé à la recherche

1. Préparer la solution de travail : Mélanger la solution A et la solution B selon un rapport de 1: 1 immédiatement avant utilisation.
2. Préparer la membrane : Après l'incubation avec l'anticorps primaire et l'anticorps secondaire conjugué à la HRP, rincer la membrane deux fois avec du TBS-T.
3. Appliquer le substrat : Utiliser environ 0,1 mL de solution de travail NeoPRO Nano par cm² de membrane.
4. Incuber : S'assurer que toute la surface de la membrane est recouverte et incuber pendant environ 1,5 minute.
5. Acquérir le signal : Détecter le signal chimiluminescent à l'aide d'un système d'imagerie ou d'un film autoradiographique.
6. Optimiser l'exposition : En cas de signal inconnu, des temps d'exposition initiaux de 15 secondes, 30 secondes, 1 minute et 5 minutes peuvent être testés.