Met mierikswortelperoxidase (HRP)-geconjugeerde anti-cavia-antilichamen zijn enzymatische immunoreagentia die zijn ontworpen voor de gevoelige detectie van cavia-antigenen in colorimetrische en chemiluminescente immunoassays. HRP katalyseert de omzetting van substraten om versterkte detectiesignalen te genereren, waardoor deze conjugaten onmisbaar zijn voor Western blotting, ELISA en immunohistochemie (IHC).
Formaten en specificiteit
HRP-geconjugeerde antilichamen zijn beschikbaar als volledig IgG, Fc-fragmentspecifieke antilichamen of F(ab')₂-fragmenten geproduceerd in geiten- of konijnhosts. Volledige IgG-antilichamen herkennen zowel zware als lichte ketens (H+L), terwijl Fc-specifieke conjugaten selectief binden aan het Fc-gebied van cavia-IgG. De specificiteit van de antilichamen wordt gevalideerd door immuno-elektroforese en ELISA, waarbij geen detecteerbare reactiviteit tegenover niet-immunoglobuline serumproteïnen wordt waargenomen. Cross-geadsorbeerde preparaten verminderen bovendien de ongewenste binding aan immunoglobulinen van andere soorten.
Toepassingen en aanbevolen verdunningen
- Immunohistochemie (IHC) & immunocytochemie (ICC): Aanbevolen verdunning van 1:500–1:5.000 voor gevoelige kleuring van weefsels en cellen.
- Western blotting & ELISA: Typische verdunningen variëren van 1:5.000–1:100.000 met chromogene substraten en van 1:10.000–1:200.000 bij gebruik van versterkte chemiluminescentie (ECL).
- Geoptimaliseerde formaten: F(ab')₂-fragmenten hebben de voorkeur voor toepassingen met levende cellen, omdat ze Fc-receptorinteracties minimaliseren en niet-specifieke binding verminderen.
Opslagaanbevelingen
Deze conjugaten worden geleverd als gevriesdroogde preparaten of als vloeibare formuleringen in PBS/BSA. Gelyofiliseerde producten moeten worden opgeslagen bij 2–8 °C en vóór gebruik worden gereconstitueerd met gedestilleerd water (dH₂O). Voor langdurige opslag dient het gereconstitueerde antilichaam in aliquots te worden verdeeld en bewaard bij −20 °C in 50% glycerol. Natriumazide mag niet worden toegevoegd, omdat dit de enzymatische HRP-activiteit onomkeerbaar remt.
