Anticorpos primários anti-cavalo conjugados com Alexa Fluor^® 647 são imunorreativos fluorescentes de vermelho distante projetados para multiplexação e detecção de antígenos equinos com baixo fundo. São produzidos pela imunização de hospedeiros como cabra ou coelho com imunoglobulinas de cavalo purificadas, purificados por afinidade e conjugados covalentemente ao Alexa Fluor^® 647, um fluoróforo de molécula pequena com máximos de excitação/emissão de 650/665 nm. Este fluoróforo exibe excepcional fotoestabilidade, alto rendimento quântico (aproximadamente 0,33) e fluorescência estável numa ampla faixa de pH (pH 4–10), superando corantes de vermelho distante tradicionais como Cy^®5. O seu espectro de emissão no vermelho distante minimiza a sobreposição espectral com fluoróforos como FITC e PE, ao mesmo tempo que reduz significativamente a autofluorescência de tecidos e fixadores, tornando-o particularmente adequado para aplicações de fluorescência multicolor.

Aplicações

Os conjugados de Alexa Fluor^® 647 são amplamente utilizados em citometria de fluxo e separação celular ativada por fluorescência (FACS), onde o seu elevado brilho permite a detecção sensível de marcadores de superfície equinos de baixa abundância, incluindo moléculas CD4, CD8 e MHC de classe II. Em microscopia confocal e de super-resolução, a sua excelente fotoestabilidade suporta a aquisição prolongada de imagens e a obtenção de pilhas Z com fotobranqueamento mínimo. Estes conjugados também são compatíveis com plataformas de imagem no infravermelho próximo para estudos in vivo, ensaios baseados em esferas multiplex para perfilamento de citocinas e western blotting fluorescente, onde proporcionam detecção fluorescente direta sem amplificação enzimática. As diluições de trabalho típicas variam de 1:100 a 1:2.000, dependendo da aplicação experimental. Estes produtos destinam-se exclusivamente a uso em investigação e não foram concebidos para procedimentos de diagnóstico.