Anticorpos anti-cobaia conjugados com peroxidase de rábano (HRP) são imuno-reagentes enzimáticos desenvolvidos para a deteção sensível de antigénios de cobaia em imunoensaios colorimétricos e quimioluminescentes. A HRP catalisa a conversão do substrato para gerar sinais de deteção amplificados, tornando estes conjugados indispensáveis para Western blot, ELISA e imunohistoquímica (IHC).
Formatos e especificidade
Os anticorpos conjugados com HRP estão disponíveis como IgG completa, específicos para fragmentos Fc ou fragmentos F(ab')₂ produzidos em hospedeiros de cabra ou coelho. Os anticorpos IgG completos reconhecem tanto as cadeias pesadas como as leves (H+L), enquanto os conjugados específicos para Fc se ligam seletivamente à região Fc da IgG de cobaia. A especificidade dos anticorpos é validada por imunoeletroforese e ELISA, sem reatividade detetável contra proteínas séricas não imunoglobulínicas. Preparações com adsorção cruzada reduzem adicionalmente a ligação inespecífica a imunoglobulinas de outras espécies.
Aplicações e diluições recomendadas
- Imunohistoquímica (IHC) & Imunocitoquímica (ICC): Diluição recomendada de 1:500–1:5.000 para coloração sensível de tecidos e células.
- Western blot & ELISA: As diluições típicas variam de 1:5.000–1:100.000 com substratos cromogénicos e de 1:10.000–1:200.000 quando se utiliza quimioluminescência melhorada (ECL).
- Formatos otimizados: Os fragmentos F(ab')₂ são preferidos para aplicações com células vivas, minimizando as interações com recetores Fc e reduzindo a ligação inespecífica.
Recomendações de armazenamento
Estes conjugados são fornecidos como preparações liofilizadas ou formulações líquidas em PBS/BSA. Os produtos liofilizados devem ser armazenados a 2–8 °C e reconstituídos com água destilada (dH₂O) antes da utilização. Para conservação a longo prazo, deve-se aliquotar o anticorpo reconstituído e armazená-lo a −20 °C em glicerol a 50%. A azida de sódio não deve ser adicionada, pois inibe irreversivelmente a atividade enzimática da HRP.