Meerrettichperoxidase (HRP)-konjugierte Anti-Meerschweinchen-Antikörper sind enzymatische Immunreagenzien, die für den empfindlichen Nachweis von Meerschweinchen-Antigenen in kolorimetrischen und chemilumineszenten Immunassays entwickelt wurden. HRP katalysiert die Substratumwandlung zur Erzeugung verstärkter Nachweissignale, wodurch diese Konjugate unverzichtbar für Western Blot, ELISA und Immunhistochemie (IHC) sind.
Formate und Spezifität
HRP-konjugierte Antikörper sind als vollständiges IgG, Fc-fragmentspezifische oder F(ab')₂-Fragmente erhältlich, die in Ziegen- oder Kaninchenwirten hergestellt werden. Vollständige IgG-Antikörper erkennen sowohl schwere als auch leichte Ketten (H+L), während Fc-spezifische Konjugate selektiv an die Fc-Region von Meerschweinchen-IgG binden. Die Antikörperspezifität wird durch Immunoelektrophorese und ELISA validiert, wobei keine nachweisbare Reaktivität gegenüber Nicht-Immunglobulin-Serumproteinen festgestellt wird. Kreuzadsorbierte Präparate reduzieren zusätzlich die unspezifische Bindung an Immunglobuline anderer Spezies.
Anwendungen und empfohlene Verdünnungen
- Immunhistochemie (IHC) & Immunzytochemie (ICC): Empfohlene Verdünnung von 1:500–1:5.000 für empfindliche Gewebe- und Zellfärbungen.
- Western Blot & ELISA: Typische Verdünnungen liegen bei 1:5.000–1:100.000 mit chromogenen Substraten und 1:10.000–1:200.000 bei Verwendung von verstärkter Chemilumineszenz (ECL).
- Optimierte Formate: F(ab')₂-Fragmente werden für Anwendungen an lebenden Zellen bevorzugt, da sie Fc-Rezeptor-Interaktionen minimieren und unspezifische Bindungen reduzieren.
Lagerungsempfehlungen
Diese Konjugate werden entweder als lyophilisierte Präparate oder als flüssige Formulierungen in PBS/BSA geliefert. Gefriergetrocknete Produkte bei 2–8 °C lagern und vor Gebrauch mit destilliertem Wasser (dH₂O) rekonstituieren. Zur langfristigen Aufbewahrung den rekonstituierten Antikörper aliquotieren und bei −20 °C in 50 % Glycerin lagern. Natriumazid sollte nicht zugesetzt werden, da es die enzymatische HRP-Aktivität irreversibel hemmt.