Anticuerpos primarios anti-caballo conjugados con Alexa Fluor^® 647 son inmunorreactivos fluorescentes de rojo lejano diseñados para la multiplexación y la detección de antígenos equinos con bajo fondo. Se producen inmunizando huéspedes como cabra o conejo con inmunoglobulinas de caballo purificadas, se purifican por afinidad y se conjugan covalentemente con Alexa Fluor^® 647, un fluoróforo de molécula pequeña con máximos de excitación/emisión de 650/665 nm. Este fluoróforo exhibe una excepcional fotoestabilidad, un alto rendimiento cuántico (aproximadamente 0,33) y una fluorescencia estable en un amplio rango de pH (pH 4–10), superando a los colorantes de rojo lejano tradicionales como Cy^®5. Su espectro de emisión en el rojo lejano minimiza el solapamiento espectral con fluoróforos como FITC y PE, al tiempo que reduce significativamente la autofluorescencia de tejidos y fijadores, lo que lo hace particularmente adecuado para aplicaciones de fluorescencia multicolor.

Aplicaciones

Los conjugados de Alexa Fluor^® 647 se utilizan ampliamente en citometría de flujo y separación celular activada por fluorescencia (FACS), donde su alta luminosidad permite la detección sensible de marcadores de superficie equinos de baja abundancia, incluyendo moléculas CD4, CD8 y MHC de clase II. En microscopía confocal y de superresolución, su excelente fotoestabilidad permite la adquisición prolongada de imágenes y la obtención de pilas Z con un fotoblanqueo mínimo. Estos conjugados también son compatibles con plataformas de imagen en el infrarrojo cercano para estudios in vivo, ensayos basados en perlas multiplex para el perfilado de citocinas y western blotting fluorescente, donde proporcionan detección fluorescente directa sin amplificación enzimática. Las diluciones de trabajo típicas oscilan entre 1:100 y 1:2.000 según la aplicación experimental. Estos productos están destinados únicamente a uso en investigación y no están diseñados para procedimientos diagnósticos.