Cloroformo es un disolvente no polar clásico en bioquímica, indispensable para extracciones de lípidos y separaciones de fases debido a su densidad y solubilidad selectiva para biomoléculas anfipáticas.

Propiedades químicas

El cloroformo (CHCl₃) presenta un carbono tetraédrico unido a tres átomos de cloro y un átomo de hidrógeno, formando un líquido denso e incoloro con una densidad de aproximadamente 1,49 g/mL a 25 °C. Tiene un punto de ebullición de 61,2 °C y un punto de fusión de –63,5 °C. El cloroformo muestra baja solubilidad en agua (alrededor de 8 g/L), pero es miscible con muchos disolventes orgánicos como metanol y hexano. Su momento dipolar (1,04 D) permite interacciones de aceptación de puentes de hidrógeno. El disolvente es altamente volátil, con una presión de vapor de aproximadamente 197 mmHg a 25 °C. Las calidades estabilizadas con etanol o amilenos se usan comúnmente para inhibir la formación de fosgeno bajo exposición a la luz y al oxígeno.

Aplicaciones bioquímicas

En bioquímica de lípidos, el cloroformo es un disolvente clave en el método de extracción Folch (usualmente en relación 2:1 cloroformo:metanol), que permite la partición de fosfolípidos y glicolípidos en la fase orgánica inferior para técnicas analíticas posteriores como cromatografía en capa fina (TLC), cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS) o análisis por resonancia magnética nuclear (RMN) de ácidos grasos y gangliósidos. También se utiliza para la extracción de proteínas de membrana o partículas virales desde lisados acuosos. En flujos de trabajo de biología molecular, el cloroformo se emplea en la purificación de ácidos nucleicos por fenol-cloroformo para desnaturalizar proteínas mientras se mantiene la integridad estructural de ADN y ARN. Además, pasos de lavado con cloroformo se aplican en el análisis de carbohidratos para eliminar contaminantes lipofílicos residuales tras hidrólisis, mejorando la pureza de la muestra para cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).