Reactivos e instrumentos para inmunología, biología celular y biología molecular.

NeoPrep mini

Descripción

Neo Biotech miniprep kits (NB-60-0001) ofrecen una forma rápida y eficaz de extraer ADN plasmídico puro de Escherichia coli.
El proceso incluye la lisis alcalina de las células bacterianas y la unión del ADN a sílice en condiciones de alta salinidad.
El ADN resultante es ideal para la PCR, la secuenciación fluorescente automatizada y diversas aplicaciones enzimáticas.

Condiciones de almacenamiento y preparación de reactivos

Todos los componentes del kit pueden conservarse a temperatura ambiente (20-25 °C) y son estables hasta la fecha de caducidad. Antes de usar, añadir 1 mL de Buffer A1 al vial de RNasa A y agitar en vórtex. Transfiera la solución resultante al frasco de Tampón A1 y mezcle bien. El tampón A1 con RNasa debe conservarse a 4 °C para uso frecuente y a -20 °C para uso poco frecuente. Añadir 32 mL de etanol 100% de grado biología molecular a cada botella de tampón A4. El tampón A2 puede formar un precipitado durante el almacenamiento. Si es necesario, disolver el precipitado calentando la solución a 37 °C. Los tampones A3 y AY contienen clorhidrato de guanidina. Utilice guantes y gafas protectoras cuando utilice este kit.

Componentes del sistema

• Tampón A1 - 15 mL

• Tampón A2 - 15 mL

• Tampón A3 - 20 mL

• Tampón AY - 30 mL

• Tampón A4 (concentrado) - 8 mL

• Tampón AE (no contiene EDTA) - 15 mL

• RNasa A - 5 mg

• Columnas de centrifugación Neo Biotech - 50

• Tubos de recogida (2 mL) - 50

Cultivo de bacterias:

Se recomienda el medio LB para el cultivo de células bacterianas, pero también pueden utilizarse medios ricos como 2xYT o TB.
Los medios ricos promueven un crecimiento más rápido y la entrada temprana en la fase estacionaria en comparación con LB.
Sin embargo, el uso de medios ricos puede dar lugar a un mayor número de células muertas o hambrientas, lo que resulta en un ADN plasmídico parcialmente degradado y una posible contaminación con ADN cromosómico.
Los cultivos sobrecrecidos pueden contener excesivo material bacteriano, lo que afecta a los pasos de lisis y precipitación.
Para empezar, seleccione una sola colonia de una placa selectiva e inocule 1-5 mL de medio LB con el antibiótico apropiado.
Incubar durante 12-16 horas a 37°C con agitación vigorosa.