Beta-amilasi funziona in modo diverso separando due unità di glucosio dall'estremità non riducente delle molecole di amido, producendo maltosio come prodotto principale. Questo enzima è trovato principalmente nelle piante e nei microrganismi e gioca un ruolo importante in processi come la birrificazione e la produzione alimentare, dove il maltosio è un risultato desiderato.

La misurazione dell'attività della beta-amilasi è utile per valutare la qualità dei prodotti alimentari e monitorare i processi di fermentazione. I test per la beta-amilasi spesso impiegano tecniche colorimetriche simili a quelle utilizzate per l'alfa-amilasi, consentendo ai ricercatori di quantificare l'attività enzimatica in base al rilascio di maltosio o altri zuccheri riduttori. Comprendere l'attività della beta-amilasi non solo fornisce informazioni sul metabolismo dei carboidrati, ma aiuta anche a ottimizzare le applicazioni industriali in cui la conversione dell'amido è fondamentale.