Array di anticorpi basati su etichette
Introduzione
Con gli array di anticorpi basati su etichette, i ricercatori ora possono ottenere una visione panoramica della espressione delle citochine. I livelli di espressione di centinaia di proteine target possono essere rilevati simultaneamente, incluse citochine, chemokine, fattori di crescita, fattori angiogenici, proteasi, recettori solubili e altre proteine nei supernatanti di coltura cellulare e in altri fluidi corporei. Inoltre, viene utilizzato un controllo interno per monitorare l'intero processo, compresa la biotinilazione, quindi questo array massivo identificherà con precisione le citochine disponibili nel tuo campione.
Attraverso un processo semplice, il campione viene biotinilato e successivamente dializzato in preparazione per l'incubazione con gli array. Il processo è facile da comprendere e implica la biotinilazione dell'ammina primaria delle proteine nel campione. Da qui, il campione appena biotinilato viene aggiunto all'array di anticorpi, sia su membrana che su vetrino, e incubato a temperatura ambiente. Dopo l'incubazione con HRP coniugato con streptavidina o Hilyte Fluor 555 coniugato con streptavidina, i segnali possono essere visualizzati tramite chemiluminescenza o fluorescenza, rispettivamente.
Contenuto del Kit
- Tubi di dialisi e supporto galleggiante
- Reagente di marcatura
- Soluzione di arresto
- Raybio® Array di anticorpi basato su biotina su vetrino con cornice o su membrane
- Buffer di blocco
- Buffer di lavaggio 20X I
- Buffer di lavaggio 20X II
- HRP coniugato con streptavidina o Hilyte Fluor 555 coniugato con streptavidina
- Pellicola adesiva
- Buffer per siero (solo nei kit L-Series su vetrino)
- Colonna per centrifuga
Come funziona
Diagramma del test
I campioni vengono dializzati prima della fase di biotinilazione. Attraverso un processo semplice, l'ammina primaria delle proteine nel campione viene biotinilata, seguita dalla dialisi per rimuovere la biotina libera. Da qui, il campione appena biotinilato viene aggiunto alla membrana dell'array o al vetrino e incubato a temperatura ambiente. Dopo l'incubazione con HRP coniugato con streptavidina o Fluor coniugato con streptavidina, i segnali possono essere visualizzati tramite chemiluminescenza o fluorescenza. La procedura sperimentale è semplice e può essere eseguita in qualsiasi laboratorio.
| 1. Supernatante di coltura cellulare | 2. Siero o plasma |
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